Tècnica:
Per a la seqüenciació de DNA s'utilitza el mètode Sanger amb una polimerasa termoestable i amb terminadors fluorescents que permeten establir un procés cíclic de PCR; la reacció es produeix en un termociclador. El producte, un cop preparat, se separa mitjançant l’electroforesi capil·lar desnaturalitzant, que ordena les molècules segons el pes molecular. Un programari apropiat i els calibratges dels colors dels fluorocroms aplicats permeten establir la relació dels nucleòtids terminadors de mida més petita a més gran.
1. Termociclador 2. Esquema PCR
3. Detall de l'electroforesi capil·lar 4. Esquema de funcionament de l'electroforesi
5. Fragment de seqüència de DNA
Un procés semblant es pot preparar marcant fluorescentment un encebador en una reacció de PCR, llavors l’electroforesi capil·lar permet determinar diferents mides de fragments amplificats, i fa una
anàlisi de fragments de fins a unes 500 bases.
Anàlisi de fragments de DNA